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          首頁 >>> 產品展示 >>>  >>> clover試劑盒 >>> (C/N:CE208-Y)iElisaT-2 毒素檢測試劑盒
        產品名稱: iElisaT-2 毒素檢測試劑盒
        產品時間: 2019-10-23
        產品型號: (C/N:CE208-Y)
        產品特點: iElisaT-2 毒素檢測試劑盒

        iElisaT-2 毒素檢測試劑盒

        iElisaT-2 毒素檢測試劑盒

        iElisaT-2 毒素檢測試劑盒 的詳細介紹

        iElisaT-2 毒素檢測試劑盒

        1. 概要 T2 毒素(T2)是由多種鐮刀菌產生的一種霉菌 毒素。主要污染小麥、大麥、玉米等糧食作物及其 制品,對人類健康及畜牧業構成了較大危害。T-2 毒素主要影響血液,肝臟,腎臟,胰腺肌肉及淋巴 細胞的功能,T-2 毒素中毒后的一般臨床癥狀為厭 食、嘔吐、腹瀉、生長停滯、繁殖和神經機能障礙 等。使用 T2 毒素試劑盒則能夠快速而準確的分析 樣品中 T2 毒素殘留。 2. 原理 測定的基礎是抗原-抗體反應。微孔板上包被有 偶聯抗原。分別加入T2毒素標準品或樣品、抗體和 酶標二抗于微孔中,樣品/標準品競爭結合抗體,酶 標二抗可與一抗結合而于酶標版上的包被抗原結 合。反應洗滌后,加入TMB底物顯藍色,加入終止 液后顏色由藍變黃,用酶標儀在450nm處檢測,吸 光值與樣品中T2毒素含量成負相關,與標準曲線比 較即可得出T2毒素的含量。 3. 試劑盒的組成 1) 包被有抗原的96微孔板:1塊(96 孔,12條×8 孔) 2) T2毒素標準品:0 ng/ml、0.5 ng/ml、 1.0ng/ml、2.0ng/ml、5.0ng/ml、20ng/ml 1 瓶 × 1.0ml 3) T2抗體 1 瓶 ×10ml 4) 酶標抗體 1 瓶 ×10ml 5) 10× 濃縮洗滌液: 1 瓶 × 50ml 6) T2稀釋緩沖液A: 1 瓶 ×50ml 7) T2稀釋緩沖液B: 1 瓶 ×50ml 8) 顯色底物TMB: 1 瓶 ×17ml 9) 終止液: 1 瓶 × 7ml 10) 試劑盒說明書: 1 份 11) 質檢報告: 1 份 4. 需要的儀器、試劑 1)儀器 —酶標儀 450nm(iElisa 全自動酶標儀或相當者) —微量移液器:20μl-200μl 單道,100μl-1000μl 單道, 50μl-300μl 八道 —多功能旋轉混合器(或者搖床、高速均質器) —酶標板振蕩器 —渦旋混合器 —50ml 離心管 —1.5ml 離心管 —定性濾紙 —過濾漏斗 —天平:感量 0.01g 2) 試劑 —樣品提取液 70%甲醇:取 700ml 甲醇,加 300ml 純水,混勻。 5. 樣品處理 5.1 谷物(玉米、小麥、高粱、大米、大豆): 1) 稱取 5.0g 粉碎樣品于 50ml 離心管中,加入 25.0ml 樣品提取液 70%甲醇,置于多功能旋轉 混合器上振蕩 30 分鐘(或使用高速均質器均質 3 分鐘,或搖床上振蕩 40 分鐘)。 2) 將提取液用普通濾紙過濾,吸取 100μl 濾液置 于 1.5ml 離心管中,加入 500μl T2 稀釋緩沖液 A,用渦旋混合器混勻。 稀釋倍數:30 5.2 飼料: 1) 稱取 5.0g 粉碎樣品于 50ml 離心管中,加入 25.0ml 樣品提取液 70%甲醇,置于多功能旋轉 混合器上振蕩 30 分鐘(或使用高速均質器均 質 3 分鐘,或搖床上振蕩 40 分鐘)。 2) 將提取液用普通濾紙過濾,用 0.22μm 有機系 濾膜過濾后,取 50μl 濾液置于 1.5ml 離心管中, 加入 500ul T2 稀釋緩沖液 B,用渦旋混合器混 勻。 稀釋倍數:30 6. 酶聯免疫分析程序 6.1 測定之前注意事項 1) 使用前將所有試劑平衡至室溫(20-25℃)。 2) 使用后迅速將試劑放入 2-8℃冷藏。 3) 在 ELISA 分析中的再現性,很大程度上取決于 洗板的*性,正確的洗板操作是 ELISA 測定 程序中的要點。4) 所有溫育過程應避免陽光直射,并按要求用蓋 板覆蓋住酶標板。 6.2 溶液的配制 1) 提取液的配制: 根據實驗所需的量配制 70%的 甲醇水溶液(水要用純水、或蒸餾水、去離子 水) 2) 洗滌液的配制:將濃縮洗滌液用純水稀釋 10 倍后使用。(例如:取 10 ml 濃縮液+90 ml 純 水, 可以用于 32 孔的檢測)。 6.3 測定程序 1) 將足夠標準品和樣品所用數量的孔條插入酶 標板架,標準品和樣品做兩個平行實驗,記錄 下標準和樣品的位置。未使用的酶標板用鋁箔 袋封好置 2-8℃冷藏保存。 2) 分別吸取50μl 標準品和樣品加至相應的微孔 (雙孔)中,然后再各加入50μl的酶標二抗, 后加入50μl的T2抗體,裝入袋中密封,室溫 (25℃)溫育15min。 3) 倒出孔中的液體,每孔加入250μl 稀釋好的洗 滌液洗滌,重復操作四次。洗板時每次間隔30s, 洗完后用力在吸水紙上排干。 4) 每孔加入100μl顯色底物,避光室溫(25℃)溫 育10min。 5) 每孔加入50μl終止液,混勻。 6) 置于酶標儀中,振蕩混勻,在450nm處測定吸 光度值(OD值),參比波長630nm。(iElisa全 自動酶標儀可以直接讀出、打印濃度值)。 7. 結果判定 1)所獲得的每個濃度標準溶液和樣本吸光度值的 平均值(B)除以*個標準(0 標準)的吸光 度值(B0)再乘以 100%,即百分吸光度值。 百分吸光度值(%)= B ×100% B0 以 T2 毒素標準品濃度值(ppb)為 X 軸,百分 吸光度值為 Y 軸,繪制標準曲線圖。相對應每一個 樣品的濃度可以從標準曲線上讀出。也可以用回歸 方程法,計算出樣本溶液濃度。利用計算機專業軟 件,更便于大量樣品的快速分析。 2) 樣品的實際濃度為讀數結果乘以相應稀釋倍 數。 3) 如果測定值超出檢測范圍,樣品提取溶液按一 定的比例用 70%甲醇進行稀釋。 8. 注意事項 1) 室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫(20- 25℃)會導致數值偏低。 2) 在洗板過程中如果出現板孔干燥過久的情況, 則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現 象。所以洗板排干后應立即進行下一步操作。 3) 標準物質和顯色液對光敏感,避免直接暴露在 光線下。 4) 混合要均勻,洗板要*(包括加樣品和標準 液的時候都必需充分混合均勻)。 5) 終止液為強酸性物質,避免接觸皮膚。 6) 不要使用過了有效期的試劑盒,也不要混合使 用不同批次的試劑盒,這樣會引起測定結果不 準確。 7) 試劑盒的儲存條件是2-8℃,切勿冷凍。 9. 試劑盒的性能指標 1) 檢測限 LOD: 谷物 10ppb(μg/kg),飼料 20ppb, (LOD:空白樣品測定值+2 倍標準偏差 SD) 2) 定量限 LOQ: 谷物 15ppb,飼料 20ppb。 3) 定 量 檢 測 范 圍 : 谷 物 15-600ppb , 飼 料 20-600ppb。

        iElisaT-2 毒素檢測試劑盒

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